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    • 专利摘要:

    公开号:WO1991010371A1
    申请号:PCT/JP1991/000008
    申请日:1991-01-09
    公开日:1991-07-25
    发明作者:Kazuoki Ishihara；Ryouichi Shin
    申请人:Kabushiki Kaisha Advance；
    IPC主号:C12P7-00
    专利说明:
    [0001] M &
    [0002] A C A T酵素胆害性組成物 技術分野
    [0003] 本発明は新規な A C A T酵素胆害性組成物に係わり、 更に 詳し く は食品成分由来の A C A T酵素阻害剤を舍有する脂質 吸収阻害性可食組成物に関する。
    [0004] 背景技術
    [0005] 脂質、 特にコ レ ステ ロ ール吸収は、 小腸上皮細胞におい て、 遊離型コ レステ ロ ールが A C A T (AcylCoA- Cholesterolacyl transferase) なる酵素の媒介によって、 ェ ステル型コ レステロールになる過程が律速であると考えられ ており、 抗コ レステロール剤として、 A C A T阻害剤の有用 性が着目されており、 現在、 幾つかのものが医薬品として開 発されている。
    [0006] 発明の開示
    [0007] 従って、 本発明は食品成分由来の A C A T酵素阻害性組成 物を開発することを目的とする。
    [0008] 本発明の他の目的及び特長は以下の記述から明らかな通り である。
    [0009] 本発明に従えば、 微生物又は植物脂質由来であり、 かつ、 その分子式が C18H 3202又は C, BH3。02である脂質酸様物質を有 効成分として舍有する A C A T酵素胆害性組成物が提供され る。 11面の簡単な説明
    [0010] 第 1図は脂肪酸様物質 Aの M Sスぺク トル図である。
    [0011] 第 2図は脂肪酸様物質 Aのメ チルエステル化物の M S スぺ ク トル図である。
    [0012] 第 3図は脂肪酸様物質 Bの M Sスぺク ト ル図である。
    [0013] 第 4図は脂肪酸様物質 B のメ チルヱステル化物の M S スぺ ク トル図である。
    [0014] 発明を実施するための最良の形態
    [0015] 本発明者らは、 前記目的を達成すべく 、 鋭意研究の結果、 所謂機能性食品成分等として常用に適したものとして、 乳酸 菌等の微生物脂質、 米ヌ力、 フ スマ脂質分解物由来のある種 の脂肪酸様物質が顕著な当該酵素阻害活性を有することを知 見し、 本発明に到達したものである。
    [0016] 以下、 本発明につき詳細に分説する。
    [0017] 脂肪酸様物
    [0018] 本発明に係る脂肪酸様物質は、 乳酸菌等の微生物脂質、 米ヌ力、 フ スマ脂質等の植物脂質の加水 （酵素） 分解物中 に存在し、 これを常法により精製、 単離したものの分子式は じ1 8113 202又は(：1 8113。02 (第 1図〜第 4図 ： 各物質及びそのメ チルエステル化物の M S スぺク トル図参照） であり、 脂肪酸 様性状を示す。
    [0019] 本発明に従った A C A T酵素阻害性組成物は、 これらの脂 肪酸様物質を、 経口投与に支障のない適当な担体、 例えばヒ ドロキ シプロ ピルメ チルセルロースフタ レ一 トゃゼィ ン等に 配合し （好ま しい舍量は 0. 5〜 3重量％) 、 更に必要に応じ 香料、 色素などを配合する ことによって調製する こ とができ る。
    [0020] 用法 · 用晉等
    [0021] 上記物質は、 通常、 錠剤、 カプセル剤等の通常剤型で経口 にて 0. 1 mg〜10nig/kg (体重） 日程度の用量で使用する こ とができ、 食品成分でもあるから経口的には、 実質的に無毒 性である。
    [0022] 他方、 可食組成物形態で利用に供する場合は、 特にこれら 物質を強いて単離利用する必要はな く 、 微生物脂質、 米ヌ力 . フスマ脂質分解物のままで食品補助成分と して利用 してもよ い。
    [0023] A C A T活性測定法
    [0024] ハイ ダ一 （Heider) らの方法 （J. Lipid. Res. 2 1127〜 1134 (1983) に準じて行う。 すなわちゥサギを 1 %コ レステ ロール食にて 3週間飼育し、 解剖、 小腸を摘出する。 小腸上 皮を剥離し、 ホモジュナイ ザーで破砕後、 遠心分離により、 不完全破砕物等を除き、 107000 X g の沈渣を ミ ク ロソ一ム画 分と してこれを 0.154Mのリ ン酸緩衝液 （PH7. 4 ) に懸濁し A C A T酵素檁品とする。 反応は、 0.154 Mの 0. 5 リ ン酸 緩衝液 （ pH 7. 4 ) に 18nmolの牛血清ァルブ ミ ンと 18nmolの
    [0025] [ 1 ー 14〇 ] ォレィ ル〇 。 （0.018 Ci /nmol) を添加し、 37 'Cで 5分間加温後前記 A C A T酵素標品 40 ^/ （蛋白量と して 0. 2 〜 0. 4 nig) を加えて行う。 所定の時間反応後、 7 のジク ロ ロメ タ ン ： メ タノ ール （ 2 ： 1 ) 液を加えよ く 混合 し、 反応を止める と共にジク ロ ロ メ タ ン層を採り、 同画分を シリ カゲル T L C (展開溶媒石油エーテル ： ジェチルエーテ ル 95 ： 5 ) でコ レステロール才 レイ ト部を分離し、 この部分 をかき取り、 液体シンチレーショ ンカウ ンタ一でその放射活 性を測定する こ とにより、 A C A T活性を箕出する。
    [0026] 微生物脂質の調製
    [0027] 例えば G AM培地 （二 ッスィ製薬） で細菌類を培養後、 遠 心分離 （8000 X g ) により集菌し生理食塩水で 2度洗浄後、 凍結乾燥、 又は加熱乾燥し、 へキサン、 エタノ ール又はジク ロ ロメ タ ン ： メ タノ ール （ 2 ： 1 ) により抽出し、 ロータ リ 一エバボレーターで溶媒を除まして、 その脂質を得る。
    [0028] 酵母は市販のパン酵母を乾燥し、 前記の有機溶媒を用い同 様の処理を行う。
    [0029] 米ヌ力、 フスマからも同様にして脂質を得ることができる, 脂質分解物の調製
    [0030] (1) 前記の様にして得た脂質 1 gを 1 %ボリ ビニルアルコ —ルを舍む 0.15Mリ ン酸緩衝液 100 (pH8. 0 ) に懸濁し、 1 %パンク レアチン、 リパーゼ、 又はエステラーゼを加え、 40'Cで 3時間処理する （なお、 前記のようにして得られた脂 質にかえて、 微生物菌体又はヌカ、 フスマを直接酵素処理し てもよい） 。 これにより同容積のへキサンで 2度抽出し、 へ キサン層をとり、 へキサ ン除丟後脂質分解物を得ることがで きる
    [0031] (2) 前記脂質 l gに 4 N K 0 H溶液 を加え攪拌し、 60てで 30分間処理後、 H C で酸性とし、 同容積のへキサン 又はエーテルで抽出し、 抽出層をとり、 有機、溶媒除去後脂質 分解物を得ることができる。
    [0032] 実施例
    [0033] 以下実施例により本発明を更に具体的に説明するが、 本発 明の範囲を以下の実施例に限定するものでないことはいうま でもない。
    [0034] ① 脂肪酸様物暂 A (C,BH 13202)及び（C1 BH3。02)の A C A T 胆害活性
    [0035] (1) 試験管内 濃 度 阻 害 率 （％)
    [0036] ( μ g / id ) A B
    [0037] 400 94 96
    [0038] 160 74 72
    [0039] 40 38 46
    [0040] 10 24 32
    [0041] (2) 動物試験
    [0042] ハムスター （ォス 100 g ) に本物質を 1 日 1匹当り l mg を混餌投与し、 1 · 2週間後小腸上皮細胞の A C A T活性を 測定した。
    [0043] A C A T胆害率 （％) ί 1週間後 55
    [0044] ί 2週間後 49
    [0045] ② 前記調製法による各種微生物脂皙 * 米ヌ力 /フスマ脂皙 分解物の A C A T阻害活性
    [0046] 前述の脂質を 1000 g / 添加したときの A C A Τ活性を 下表に示す。 コ ン ト ロール （無添加） 100 (%)
    [0047]
    [0048] ③ 用量の依存性
    [0049] L.reuteri AD0002. B.bif idum AD00020 、 ヌ力の脂質の A C A T阻害活性の濃度依存性を次に示す。 濃 度 125 250 500 1000 g /mg
    [0050] L.reuteri ATCC 66* 53 41 29
    [0051] B . b i f i dum ATCC 52 40 23 7
    [0052] ヌ 力 100 83 48 3
    [0053] * コ ン ト ロールを 100と したとき の相対活性
    [0054] 産業上の利用性
    [0055] 以上の説明から明らかなように、 本発明に係る A C A T酵 素胆害性組成物の有効成分である脂肪酸様物質は食品成分由 来であるから経口的には実質的に無毒性であるにも拘らず、 有効な A C A T酵素阻害活性を有するものであり、 所謂機能 性食品成分として特に有用である。
    权利要求:
    Claims0371 ^ 請 求 の 範 囲
    1 . 微生物又は植物脂質由来であり、 且つ、 その分子式が じ18113202又は(：18113。02でぁる脂質酸様物質を有効成分と して 舍有するこ とを特徴とする A C A T酵素阻害性組成物。
    2. 前記脂肪酸様物質が乳酸菌由来のものである請求の範 囲第 1項記載の組成物。
    3. 前記脂肪酸様物質が米ヌカ又はフスマ脂質由来のもの である請求の範囲第 1項記載の組成物。
    类似技术:
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    同族专利:
    公开号 | 公开日
    CA2050293C|1995-05-09|
    JP2917037B2|1999-07-12|
    EP0462291A1|1991-12-27|
    EP0462291A4|1993-05-05|
    JPH03227940A|1991-10-08|
    引用文献:
    公开号 | 申请日 | 公开日 | 申请人 | 专利标题
    JPS60115522A|1983-10-24|1985-06-22|Senchiyurii Lab Inc|Composite fatty acid composition for lowering cholesterol and triglyceride level in blood|
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    JPH01501308A|1986-11-06|1989-05-11|||
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    法律状态:
    1991-07-25| AK| Designated states|Kind code of ref document: A1 Designated state(s): CA US |
    1991-07-25| AL| Designated countries for regional patents|Kind code of ref document: A1 Designated state(s): CH DE FR GB IT NL SE |
    1991-09-06| WWE| Wipo information: entry into national phase|Ref document number: 1991901903 Country of ref document: EP |
    1991-09-09| WWE| Wipo information: entry into national phase|Ref document number: 2050293 Country of ref document: CA |
    1991-12-27| WWP| Wipo information: published in national office|Ref document number: 1991901903 Country of ref document: EP |
    1994-03-08| WWW| Wipo information: withdrawn in national office|Ref document number: 1991901903 Country of ref document: EP |
    优先权:
    申请号 | 申请日 | 专利标题
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